“Evaluación de especies de Agave sobre los procesos fisiopatológicos asociados al Alzheimer.”

Abstract

Las especies del género Agave como Agave tequilana, Agave angustifolia y Agave americana, son usadas en la medicina tradicional Mexicana para tratar padecimientos asociados a la inflamación, entre los que se incluyen los neurodegenerativos. Las pencas de estas plantas poseen compuestos del grupo de las saponinas, a las cuales se les han identificado propiedades anti-inflamatorias en diferentes modelos. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de Agave tequilana Weber, A. angustifolia Haw y A.americana L.sobre los aspectos fisiopatológicos asociados al Alzheimer. Se hizo una extracción acetónica de pencas de dichas especies, se analizó el efecto anti-inflamatorio in vivo a través de la inducción de edema auricular con TPA (25 µg/ml) en ratones. Después, se continuó con un fraccionamiento bio-dirigido con el mismo modelo, para elucidar el compuesto activo. El extracto acetónico todas las especies estudiadas, disminuyó la inflamación siendo el de A. americana el más activo, con un 81% de inhibición de edema (i.e.), a partir de éste se obtuvieron 6 fracciones, de las cuales la F5 fue más activa con un 85.6% de i. e. y mediante el fraccionamiento cromatográfico de ésta, se obtuvo un compuesto identificado por RMN DEPT, COSY, HSQC y HMBC como (25R)-5 alpha-spirostan-3 beta, 6 alpha, 23 alpha-triol-3, 6-di-O-beta-D- glucopyranoside (Cantalasaponina-1), la cual presentó un efecto dependiente de la dosis, de hasta el 90 % de i.e. auricular a la dosis mayor. El efecto de los Agaves sobre los aspectos fisiopatológicos asociados al Alzheimer, se evaluó usando el modelo de neuroinflamación inducida por la administración i.p. de lipopolisacárido (LPS) de E. coli. Estos animales fueron tratados con el extracto acetónico de la especie de Agave correspondiente (via oral v.o.), ó vehículo. Al grupo control no se le suministró LPS. Los animales fueron sacrificados, se disecaron los cerebros. Los homogenados se éstos sirvieron para evaluar la actividad sobre las enzimas Acetilcolinesterasa (AChE), Glutatión Reductasa (GR) y NADPH-oxidasa in vitro. El extracto de A. angustifolia provocó una inhibición a-competitiva sobre la actividad de AChE, mientras que A. tequilana y A. americana no inhibieron la actividad de dicha enzima, aunque si lograron inhibir el daño causado por el LPS. La actividad de la enzima GR, observa un incremento significativo en su actividad y NADPH-oxidasa disminuyó significativamente con la administración de los extractos en comparación al grupo control. El efecto inmunomodulador sobre los homogenados de cerebro se evaluó mediante la cuantificación de citocinas pro-inflamatorias (INF-ɣ, TNF-α. IL-1β e IL-6) por la técnica de ELISA. La IL-6- y la IL-1β se incrementaron con respecto al control y A. americana L. mostró mayor concentración de IL-1β. Se observó una reducción en las citocinasTNF α e INF ɣ comparadas con el control Basal, el valor menor se obyuvo con A. tequilana (0.28 pg/mg) y para INF ɣ, el valor menor correspondió a A. americana (1.21 pg/mg). Con relación al daño cognitivo inducido con Escopolamina a través del paradigma de Evitación Pasiva, A. tequilana y A. americana mejoran el proceso de aprendizaje y sus tiempos de retención fueron estadísticamente semejantes con respecto al control Basal (256.28, 259.57 y 270 seg, respectivamente).