RESUMEN:
Las diferencias en la incidencia de las enfermedades cardiovasculares (ECV) asociadas al género sugieren que factores ligados al sexo pueden ejercer un papel importante en el desarrollo de estas enfermedades, posiblemente relacionados con los diferentes estados hormonales entre hombres y mujeres. La frecuencia de ECV en mujeres premenopaúsicas es significativamente menor comparado con hombres de la misma edad y mujeres posmenopaúsicas, aún en igualdad de riesgo cardiovascular (Diabetes, Hepertensión, Sedentarismo, obesitat, etc.). Sin embargo, estas diferencias en morbilidad y mortalidad disminuyen después de la menopausia. Se le ha atribuido a los cambios en los niveles plasmáticos de estrógenos durante el transcurso de la vida, un papel importante en la incidencia de estos procesos patológicos.
Las hormonas sexuales esteroides están involucradas en un gran número de procesos fisiológicos y fisiopatológicos. Clásicamente, sus efectos se han descrito como modulatorios de la transcripción nuclear. Sin embargo, otros de sus efectos han sido reconocidos como de origen no genómicos o ejercidos a nivel de la membrana plasmática, ya que ocurren en periodos muy cortos. Las células endoteliales en los diferentes sitios del árbol vascular difieren en estructura y función, y su respuesta a las esteroides sexuales párese ser dependientes de origen celular y de género. El objetivo de este trabajo fue evaluar los efectos de testosterona (T) y el 17B-estradiol (E2), en células entodeliales microvasculares coronarias (CEMC) de rata macho y hembra en cultivo. Analizamos los efectos rápidos, no-genómicos de las hormondas sexuales sobre la cinética intracelular de calcio ([CA2+]i), utiizando el agente quelante de calcio FURA 2AM y un sistema computarizado de microscopia invers (programa InCyt Im2) el cual mide la fluorescencia emitida por el complejo FURA 2-CA2+ al ser estimulado por luz UV. También exploramos la posibilidad de la aromatización de T a E2 a través del uso de inhibidores selectivos para la enzima aromatasa (P450AROM); Aminoglutetimida (4uM) y 4-hidroxiandrostenedione (4uM). Investiamos la presencia de la enzima aromatasa (P450AROM) a través de estudios inmunocitoquímicos e inmunoblot, utilizando el fragmento D(ab9)2 de los anticuerpos policlónales generados contra un péptido sintético de 20 aminoácidos de la proteína P450AROM de rata y a través de ensayos de hibridación in situ investigamos la presencia del RNAm de P450AROM en estas células. La actividad de P450AROM se demostró por la pérdida estéreoespecifica del átomo de tritio del substrato, [1B-3H] androstenedione.
ABSTRACT:
Differences in the incidence of cardiovascular diseases (CVD) were associated to the group that factors linked to sex can play an important role in the development of these diseases, and are related to the different hormonal states between men and women. The frequency of CVD in premenopausal women is significantly lower with men of the same age and postmenopausal women, even in equal cardiovascular risk (Diabetes, Hepatitis, Sedentary, obesity, etc.). However, these differences in morbidity and mortality decrease after menopause. An important role in the incidence of these pathological processes has been attributed to the changes in plasma levels of estrogen during the course of life.
Sex steroid hormones are involved in a large number of physiological and pathophysiological processes. Classically, its effects have been described as modulators of nuclear transcription. However, other effects have been recognized as having a non-genomic origin or effects at the level of the plasma membrane, since they occur in very short periods. The endothelial cells in the different sites of the vascular tree differ in structure and function, and their response to sex steroids are dependent on cell origin and gender. The objective of this work was to evaluate the effects of testosterone (T) and 17B-estradiol (E2) in coronary microvascular entodel cells (CEMC) of male and female rat in culture. We analyzed the rapid, non-genomic effects of sex hormones on the intracellular calcium kinetics ([CA2 +] i), using the calcium chelating agent FURA 2AM and a computerized reverse microscopy system (InCyt Im2 program) which measures the fluorescence emitted by the FURA 2-CA2 + complex when stimulated by UV light. We also explored the possibility of aromatization from T to E2 through the use of selective inhibitors for the aromatase enzyme (P450AROM); Aminoglutethimide (4uM) and 4-hydroxyandrostenedione (4uM). Investigating the presence of the aromatase enzyme (P450AROM) through immunocytochemical and immunoblot studies, using the D (ab9) 2 fragment of the polyclonal antibodies generated against a synthetic amino acid of 20 amino acids of the rat P450AROM protein and through hybridization assays in situ we investigated the presence of P450AROM mRNA in these cells. The activity of P450AROM was demonstrated by the stereospecific loss of the tritium atom of the substrate, [1B-3H] androstenedione.
