Evaluación de la actividad antiartrítica de acetato de lupeol y derivado de Br-5-ASA en un modelo murino

Abstract

RESUMEN: El acetato de lupeol (AL) es un triterpeno que ha sido aislado de la nuez de karite (Vitellaria paradoxa), mango (Mangifera indica), pimiento verde (Capsicum annuum), de C. tehuacanensis y de otras especies. El AL posee varias actividades biológicas destacando la actividad antiinflamatoria en modelo sistémico (inducción del edema con Carragenina) y tópico, también se describe que presenta efecto preventivo en caso de osteoporosis, así como antioxidante, anticancerígeno e inmunomodulador. El Br-5-ASA es un derivado del ácido 5 aminosalicílico (5-ASA), el cual fue desarrollada para el tratamiento de las enfermedades inflamatorias intestinales crónicas, cuyo mecanismo de acción es inhibir la producción de eicosanoides, citoquinas y unión al interferón. A la fecha, se ha reportado la actividad antiinflamatoria tópica del Br-5-ASA en modelo TPA (12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato), mostrando un efecto similar al fármaco de referencia (0.46 mg/oreja); así mismo, se evaluó la actividad antioxidante por el método colorimétrico empleando DPPH y ABTS, a la concentración 0.012 mM mostró16% de inhibición de DPPH y 21% de inhibición para ABTS. Así mismo el Br-5-ASA fue evaluado en modelo murino donde a la dosis de 2 g/kg no mostró efectos adversos ni toxicidad. Tanto el AL como Br-5-ASA mostraron actividad antiinflamatoria tópica y sistémica (TPA y carragenina), presentando las siguientes DE50= 0.91 mg/oreja (AL) y 2.15 mg/oreja (Br-5-ASA) en el modelo tópico y su efecto máximo en el modelo sistémico se observó a la 5ª hora, siendo su DE50 =243.9 y 239.23 mg/kg, respectivamente. Por otro lado, en el modelo de artritis inducido con AFC, AL (125 mg/kg) mostró un efecto antiinflamatorio similar al fármaco de referencia (FBZ, 100 mg/kg), donde el efecto antiinflamatorio máximo mostrado fue >40% a partir del día 15 al día 28, mientras que Br-5-ASA (125 mg/kg), presentó una moderada actividad antiinflamatoria, con un efecto máximo no mayor al 25% en comparación con FBZ (100 mg/kg). También se llevó a cabo la cuantificación de COX-2 en ganglios poplíteos, donde el AL presentó la concentración más baja de esta enzima mostrando 8.99 U/mg proteína, en comparación con AFC el cual mostro 11.37 U/mg proteína y FBZ 10.14 U/mg proteína, mientras que el Br-5-ASA presentó 10.94 U/mg proteína, valor similar a FBZ. Por último el análisis histológico realizado en articulación, tejido blando, hígado y ganglio, mostró que los animales tratados con AL presentaron una reducción de la inflamación en el tejido sinovial, así como una reducción de la concentración leucocitaria en el sitio de lesión en comparación con AFC y no mostro daño a nivel hepático, mientras que el Br-5-ASA también redujo el proceso inflamatorio y una reducción de linfocitos en el sitio de lesión mostro un ligero daño hepático generado por la administración continua a una dosis de 125 mg/kg. ABSTRACT: Lupeol acetate (AL) is a triterpene that has been isolated from the karite nut (Vitellaria paradoxa), mango (Mangifera indica), green pepper (Capsicum annuum), C. tehuacanensis and other species. The AL has several biological activities highlighting the anti-inflammatory activity in systemic model (induction of edema with Carrageenan) and topical, it is also described as having a preventive effect in case of osteoporosis, as well as antioxidant, anticancer and immunomodulator. In relation to the toxicity studies, the toxicity of Lupeol Acetate has not been determined, however, the Lupeol precursor molecule has no toxicity in animal models, where at 2 g/kg orally it did not produce adverse effects in rats or mice. Br-5-ASA is a derivative of 5-aminosalicylic acid (5-ASA), which was developed for the treatment of chronic intestinal inflammatory diseases, whose mechanism of action is to inhibit the production of eicosanoids, cytokines and interferon binding. To date, the topical anti-inflammatory activity of Br-5-ASA has been reported in the TPA model, showing an effect similar to the reference drug (0.46 mg / ear); Likewise, the antioxidant activity was evaluated by the colorimetric method using DPPH and ABTS, at the concentration 0.012 mM showed 16% inhibition of DPPH and 21% inhibition for ABTS. Likewise, Br-5-ASA was evaluated in a murine model where, at a dose of 2 g/kg, it did not show adverse effects or toxicity. Both AL and Br-5-ASA showed topical and systemic anti-inflammatory activity (TPA and carrageenan), presenting the following ED50 = 0.91 mg/ear (AL) and 2.15 mg/ear (Br-5-ASA) in the topical model and its maximum effect in the systemic model was observed at the 5th h, with its ED50 = 243.9 and 239.23 mg / kg, respectively. Furthermore, in the model of arthritis induced with AFC, AL (125 mg/kg) showed an antiinflammatory effect similar to reference drug (FBZ, 100 mg/kg), where the anti-inflammatory effect maximum shown was> 40% from day 15 to day 28, while Br-5-ASA (125 mg/kg), showed a moderate anti-inflammatory activity, with a maximum effect no greater than 25% compared to FBZ (100 mg/kg). The quantification of COX-2 in popliteal ganglia was also carried out, where the AL showed the lowest concentration of this enzyme showing 8.99 U/mg protein, in comparison with AFC which showed 11.37 U / mg protein and FBZ 10.14 U/mg protein, while Br-5-ASA presented 10.94 U/mg protein, similar to FBZ. Finally, the histological analysis performed on joint, soft tissue, liver and ganglion, showed that the animals treated with LA presented a reduction of inflammation in the synovial tissue, as well as a reduction of the leukocyte concentration at the site of injury compared to AFC and showed no damage to the liver, while Br-5-ASA also reduced the inflammatory process and a reduction of lymphocytes at the site of injury showed a slight liver damage generated by continuous administration at a dose of 125 mg/kg .