RESUMEN: En el mundo, el cáncer es uno de los principales problemas de salud. El CM es la causa más común de muerte por neoplasias en mujeres en todo el mundo. En México, los tres principales tipos de cáncer en mujeres que causaron fallecimientos durante 2007 fueron: el de mama (13.8%), cuello uterino (12.1%) e hígado (7.6%).
Hasta el momento, existen pocos marcadores moleculares de cáncer aplicados en la práctica clínica, por lo cual hay una imperiosa necesidad para encontrar biomarcadores, en particular para el CM y que pudieran ayudarnos a detectarlo en etapas pre-invasivas o tempranas. Se ha reportado que el canal iónico HERG1 juega un papel importante en diferentes tipos de neoplasias, en las cuales se ha encontrado sobreexpresado. La sobreexpresión de HERG1 se ha establecido como marcador de algunas neoplasias como cáncer de colon y leucemias y se ha relacionado directamente con la invasividad de las neoplasias.
Por lo anterior, en el presente trabajo se llevó a cabo el análisis de la expresión del canal iónico HERG1 (Kv11.1, KCNH2) por PCR cuantitativa en biopsias de CM de pacientes, estudio que hasta el momento no se ha realizado. Los resultados que se obtuvieron con PCR tiempo real fue: se analizaron 39 muestras de CM, las cuales se pueden clasificar por su grado histológico en: Grado I, 13 muestras (41%), Grado II, 16 muestras (50%) y Grado III, 3 muestras (9%). Todas las muestras estudiadas amplificaron con el gen de control interno de la reacción de la qPCR, actina humana, de las cuales se encontraron 32 muestras positivas para HERG1B (82%) y 7 muestras negativas (18%). De las 32 muestras positivas a HERG1B con PCR en tiempo real, 29 muestras tienen el diagnóstico histopatológico de CM Ductal (91%) y 3 tienen el diagnóstico histopatológico de CM lobulillar infiltrante (9%). De las 27 muestras positivas con diagnostico histopatologico de CM Ductal a HERG1B con PCR en tiempo real, 27 muestras fueron CM ductal infiltrante (93%) y 2 muestras fueron CM ductal In Situ (7%). El
porcentaje de muestras de CM positivas a nuestro marcador fueron un poco más alto que los reportados con otros marcadores del mismo tipo (canales iónicos) en cáncer como: TRPM8 en cáncer de próstata, que con PCR en tiempo real se reportó una tasa de positividad del 64%. En cáncer colo-rectal, se obtuvo una tasa del 60% del gen HERG1 y en gliomas primarios se obtuvo cerca del 80%, usando PCR convencional. Por inmunohistoquímica, la proteína de HERG1B se encontró sólo en las células tumorales de CM. Es indudable que la expresión de HERG1B está afectada en el CM, por lo que se debe de estudiar a fondo para determinar de qué manera afecta el proceso de carcinogénesis. Este trabajo es innovador ya que este gen aun no se ha reportado en CM.
ABSTRACT: Cancer is one of the main health issues worldwide. Breast cancer (BC) is the most frequent death cause by neoplasia in women all over the world. In Mexico, the three most important cancer types that caused death in women during 2007 were: breast cancer (13.8%), cervical cancer (12.1%) and liver cancer (7.6%).
Until now, there are a few molecular markers for cancer applied to the clinical practice, therefore, there is a vital need to find cancer biomarkers specifically, for BC that can help us to detect it in early or pre-invasive stages. It has been reported the overexpression of HERG1 ion channel in several neoplasies, which suggests strongly that it has an important role in cancer. In fact, it has been established as a cancer biomarker in some leukemias and colon cancer, as well as its direct relationship with cancer invasiveness.
For this, we perform the analysis of the HERG1 channel (Kv11.1, KCNH2) gene expression by quantitative PCR in biopsies from breast cancer patients, that has never been done before. The results are: 39 BC samples were analyzed, that can be classified according to their histological grade in: Grade I, 13 samples (41%); Grade II: 16 samples (50%) and Grade III: 3 samples (9%). All 39 analyzed samples amplified with the inner qPCR reaction control gene for human Actin, from which 32 samples were positive for HERG1B (82%) and 7 were negative (18%). 32 from the 29 samples positive to HERG1B have the histopathological diagnosis of ductal BC (91%) and 3 were classified as infiltrating lobular carcinoma (9%). The rate of BC samples positive to our marker was higher than that reported with other markers of the same kind (ion channels) in cancer such as: TRPM8 in prostate cancer with a 64% of positives with qPCR. In colon cancer, HERG1 had a rate of 60% and 80% for primary glioma, by conventional PCR. By immunohistochemistry assays, the HERG1B protein was detected only in breast cancer cells. It is unquestionable that the HERG1B gene expression is affected in
the BC, for this reason, its has to be analyzed in depth to determine in which way it affects the carcinogenesis process. This thesis work is innovative, as this gene has not been reported before as a marker in BC.
