RESUMEN: Las leishmaniosis son un grupo de enfermedades clínicamente diferentes distribuidas
mundialmente que afectan principalmente áreas en desarrollo, aquejan a más de 12 millones
de individuos en 88 países con una población en riesgo de 350 millones y son causadas por
parásitos protozoarios del género Leishmania, presentan diversas manifestaciones clínicas,
desde lesiones cutáneas hasta la forma diseminada (visceral). En la República Mexicana la
leishmaniosis cutánea localizada (LCL) es la forma clínica predominante en el 99.15% de los
casos reportados hasta 2005 y actualmente los medicamentos que existen para el tratamiento
de dicho padecimiento no son totalmente efectivos, por lo que es necesario el uso de terapias
más eficientes, rápidas y de bajo costo.
El dializado de extractos leucocitarios (DLE) es un modulador del sistema inmune que
transfiere la respuesta inmune celular de un organismo a otro. El presente trabajo tiene como
objetivo determinar la eficacia del DLE en el tratamiento de la LCL en un modelo murino
mediante el análisis de las manifestaciones físicas, histológicas del sitio de la lesión y la
evolución general de la enfermedad. Para esto se utilizaron ratones BALB/c hembras de 6-8
semanas de edad, inoculados en la región dorsal de manera intradérmica con promastigotes
metacíclicos de Leishmania (Leishmania) mexicana. Se generaron diferentes lotes de DLE
para el tratamiento de los animales con LCL, se evaluó el proceso de infección mediante la
medida del tamaño de la lesión y la evolución de la enfermedad con y sin tratamiento.
Se estableció un modelo de infección con la inoculación intradérmica en región dorsal de
promastigotes de Leishmania, evaluando el tamaño de lesión con diferentes concentraciones
de parásitos inoculados. La inoculación intradérmica en la región dorsal no se ha encontrado
descrita en la literatura; el 90% de los reportes utilizan inoculaciones subcutáneas en cojinete
plantar, cola y base de la cola. En este modelo se generó una lesión severa, única, ulcerada, de
bordes indurados, con necrosis y reacción inflamatoria extensiva y progresiva, sin curación.
La evaluación histológica de la lesión presentó infiltrado celular inflamatorio que ocupó la
dermis, hipodermis y las capas musculares, en su mayoría se encontraron histiocitos
vacuolados multiparasitados que semejan tejido graso. Por otro lado, al evaluar el efecto en el
tratamiento de la infección con DLE se observó una reducción en el tamaño de la lesión
inversamente proporcional a la concentración administrada (dosis-dependiente), la reducción
correlacionó con la disminución de la carga parasitaria e histológicamente con un menor
infiltrado inflamatorio con carácter polimorfonuclear y menor cantidad de estructuras
parasitarias. Los datos sugieren que el tratamiento con DLE efectivo es cepa-específico.
Además se observó que la combinación de DLE con el fármaco tamoxifeno presenta un
sinergismo sobre el control de la enfermedad, generando una reducción evidente de la lesión,
disminución de la carga parasitaria e histológicamente una reducción de estructuras
parasitarias en el sitio de la lesión. En conclusión, el modelo generado es útil para evaluar la
eficacia del DLE en el control de la enfermedad y su efecto sobre la respuesta inmune del
hospedero.
ABSTRACT: Leishmaniases are a group of diseases widely spread throughout the world. The WHO has
catalogued them like neglected diseases for to be considerate non lethal. Leishmaniases affect
12 million of people in the world, with a population of 350 million at risk in 88 countries.
These diseases are caused by protozoan parasites from Leishmania genus and etiology of them
ranges from cutaneous lesions to visceral form. In the Mexican Republic, Localized Cutaneous
Leishmaniasis (LCL) is the predominant form in the 99.15% of the all cases until 2005.
Currently, the drugs used to treat leishmaniasis are not all effective and they present side
effects. On the other hand, dialyzed leukocytes extracts (DLE) modulate the immune system
by the transference of the cellular immune response in an antigen specific way. Being that the
LCL is a disease which healing depends on cellular immune response, we want to determine
the effect of the treating it with DLE, analyzing the physics features and histological
characteristics of the infection. In order to do this, we develop a model with Leishmania
(Leishmania) mexicana in dorsal region of BALB/c mice, we inoculated the parasites
intradermically to simulate a natural infection and we generated several DLE doses to treat
mice with LCL. Then, we determine the parasitic load in the skin lesion of infected mice.
We established a model of LCL in the dorsal region of mice. This way of infection had not
found in the literature. BALB/c mice developed great lesions in all of loads parasites tested,
that showed differences in the time of beginning depending of the quantity of inoculated
parasites. Pathologically, the lesions were severe at the site of cutaneous inoculation and
exhibited a progressive increase, with ulceration, necrosis and extensive inflammatory reaction
with no healing activity. Histologically, the lesions presented high density of parasites,
represented by an extensive number of vacuolated macrophages containing a large number of
parasites in the site of infection. The treatment with DLE decreased the size of lesions in a
dose-dependent manner; with minor doses we observed the best effect. The smaller lesion
correlated with reduction of parasitic load and lower quantity of parasite structures in the site
of infection as showed the histology. On the other hand, when we combined the DLE with
tamoxifen drug, we observed a synergism with both of them administrated simultaneously,
results showed smaller lesions than DLE or TAM alone.
In conclusion, generated model is useful to assess the efficacy of DLE on control of LCL and
to know its effect on the immune response of host.
