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Obtención y caracterización de dializados de extractos leucocitarios de origen bovino

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dc.contributor.author Avalos Flores, Héctor
dc.date.accessioned 2012-08-24T18:49:51Z
dc.date.available 2012-08-24T18:49:51Z
dc.date.created 2010-05
dc.date.issued 2012-08-24T18:49:51Z
dc.identifier.citation Avalos Flores, Héctor. (2010). Obtención y caracterización de dializados de extractos leucocitarios de origen bovino. (Maestría en Ciencias en Inmunología). Instituto Politécnico Nacional, Sección de Estudios de Posgrado e Investigación, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. México. es
dc.identifier.uri http://tesis.ipn.mx/handle/123456789/10641
dc.description Tesis (Maestría en Ciencias en Inmunología), Instituto Politécnico Nacional, SEPI, ENCB, 2010, 1 archivo PDF, (81 páginas). tesis.ipn.mx es
dc.description.abstract RESUMEN: Los dializados de extractos leucocitarios (DLE), contienen moléculas por debajo de 12 kDa y transfieren respuesta inmune celular (RIC) de un organismo inmunocompetente a otro. Por otra parte, es conocido que los dializados tienen la capacidad de regular a otros elementos de la respuesta inmune de manera antígeno inespecífica; sin embargo, no existe en la literatura evidencia suficiente que sustente que los dializados obtenidos de calostro y de sangre periférica de bovino sean semejantes en cuanto a su composición y efecto biológico. El objetivo de este trabajo fue demostrar la presencia de moléculas de bajo peso molecular capaces de transferir RIC utilizando dializados obtenidos a partir de calostro y de sangre periférica de bovinos. Además se determinó si éstos inducen la producción de TNF-α en células mononucleares de sangre periférica humana (CMNSP). Para ello, se obtuvieron dializados de extracto de calostro, de sangre periférica y de calostro. Todas los DLE se sometieron a electroforesis y se tiñeron con nitrato de plata para detectar péptidos de bajo peso molecular. Por otro lado, se determinó la huella espectral en el UV-VIS de cada una de las muestras y se evaluó la capacidad que tienen estos dializados de transferir respuesta celular (DTH) en un modelo murino. Se determinaron los niveles de TNF-α en CMNSP estimuladas in vitro con los diferentes DLE. Los resultados indican la presencia de péptidos de bajo peso molecular en los dializados de sangre periférica pero no en los de calostro. Los perfiles de absorción UV-VIS son distintos entre cada tipo de muestra y sólo se presentó transferencia de respuesta inmune celular con uno de los tres dializados de sangre de bovino, mientras que no hubo transferencia de DTH con los DLE de calostro. Por otra parte, las CMNSP estimuladas con los diferentes DLE fueron capaces de inducir la producción de TNF-α cuando éstas se compararon con el control sin estímulo. Sin embargo, se encontró diferencia estadística significativa (p (p<0.001) entre los DLE de bovino y el DLE humano, siendo éste último el dializado que induce una mayor cantidad de la citocina. es
dc.description.abstract ABSTRACT: Dializable Leukocyte Extracts (DLE) are immunomodulators that contents low molecular weight peptides (<12kDa) that transfer the ability to express cell-mediated immunity from sensitized donors to non-immune recipients. Also, they modulate the immune response on an antigen-independent manner. However, there is no sustained evidence that supports the similarities between DLE obtained from colostrum or bovine blood regarding chemical composition and biological effect. In this work, small molecules present in DLE derived from bovine colostrum and bovine peripheral blood mononuclear cells were characterized along with the capacity to transfer immune response. Thus, DLE from bovine colostrum and peripheral blood were obtained from healthy cows according to Lawrence procedure. Electrophoretic runs were performed using all of the extracts and the evidence of low molecular weight peptides within the DLE was proved by silver stain, in addition UV-VIS spectroscopy was carried out and the spectral profile of every sample was studied. Also the footpad swelling assay was used and transference of immune response was mainly achieved with the bovine blood dialyzates. Lastly DLE were assessed for their capability to stimulate TNF-α production using an in vitro model. Our results indicate that small peptides are found within the DLE obtained from bovine blood. Conversely, this result was not confirmed in DLE derived from colostrums. DLE had significant differences in the profiles of UV-VIS absorption while transfer of delayed type hypersensitivity was only achieved with one of three peripheral blood dialyzates. On the other hand, colostrum dialyzates were not able to confer DTH response to naive mice. Aside, mononuclear cultured cells were stimulated with all of the bovine dialyzates and produced TNF-α when compared with untreated control cells. However, statistical significance (p<0.001) was seen when bovine DLE was compared with human DLE. Also, a remarkable production of the cytokine was observed with human DLE in contrast to bovine. en
dc.language.iso es es
dc.subject Extractos leucocitarios es
dc.subject Leukocyte extracts en
dc.title Obtención y caracterización de dializados de extractos leucocitarios de origen bovino es
dc.type Tesis es
dc.contributor.advisor Serafín López, Jeanet es
dc.contributor.advisor Pérez Tapia, Sonia Mayra es


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