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Crecimiento, supervivencia y respuesta inmune de la almeja catarina (Argopecten ventricosus) tratada con productos naturales y retada con Vibrio parahaemolyticus

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dc.contributor.author Mendoza Maldonado, Gabriela Berenice
dc.date.accessioned 2020-08-01T03:30:46Z
dc.date.available 2020-08-01T03:30:46Z
dc.date.created 2019-10-17
dc.date.issued 2020-07-30
dc.identifier.citation Mendoza Maldonado, Gabriela Berenice. (2019). Crecimiento, supervivencia y respuesta inmune de la almeja catarina (Argopecten ventricosus) tratada con productos naturales y retada con Vibrio parahaemolyticus (Doctorado en Ciencias en Biotecnología), Instituto Politécnico Nacional, Centro de Investigación para el Desarrollo Integral Regional, Unidad Sinaloa. México. es
dc.identifier.uri http://tesis.ipn.mx/handle/123456789/28427
dc.description Tesis (Doctorado en Ciencias en Biotecnología), Instituto Politécnico Nacional, CIIDIR, Unidad Sinaloa, 2019, 1 archivo PDF, (178 páginas). tesis.ipn.mx es
dc.description.abstract RESUMEN: La almeja Catarina Argopecten ventricosus constituye un importante recurso pesquero en México, principalmente en el Golfo de California, pero debido a la sobrepesca se colapsaron las poblaciones naturales de esta especie, además se sabe que la incidencia de enfermedades provoca mortalidades masivas en los cultivos. Debido a esto, se han realizado esfuerzos para desarrollar el cultivo con fines comerciales y de repoblamiento. Por lo tanto se determinó la supervivencia, crecimiento y respuesta inmune de semillas y adultos de Argopecten ventricosus tratados con aditivos naturales y retados con Vibrio parahaemolyticus. La susceptibilidad y la concentración letal media de V. parahaemolyticus se evaluaron en semillas y adultos desafiados por inmersión, es decir, se inoculó la bacteria patógena en el agua de cultivo. El análisis histológico se realizó en adultos desafiados por inmersión. El crecimiento fue evaluado en semillas de A. ventricosus, adicionando en el agua una mezcla de probióticos aislados de almeja catarina (MPAC), inulina y ácido fúlvico. Organismos adultos se inyectaron en el músculo aductor con Vibrio parahaemolyticus inactivado por calor para analizar la respuesta inmune a nivel bioquímico (conteo de hemocitos, fenoloxidasa y enzimas lisosomales) y molecular (transcriptoma). Se secuenció una librería de ADNc obtenida de un pool de ARN de gónada, músculo, hepatopáncreas, branquias y hemocitos en la plataforma Illumina NextSeq 2 x 75 ciclos de organismos infectados. Las semillas y adultos fueron susceptibles a V. parahaemolyticus mostrando una CL50 de 623 UFC/mL y 62,853 UFC/mL, respectivamente. Las toxinas de V. parahaemolyticus causaron daños en las glándulas digestivas de los adultos. Se observaron variaciones significativas en el número y área de hemocitos, actividad de la fenoloxidasa y enzimas hidrolíticas lisosomales, principalmente a las 8 y 24 h después de la infección. Los aditivos naturales mejoran el crecimiento de A. ventricosus y le confieren mayor resistencia ante infecciones causadas por V. parahaemolyticus. Los aditivos mejoraron significativamente el crecimiento en peso, longitud, altura y ancho de las semillas y la supervivencia ante el reto con el vibrio. Las semillas son más susceptibles a la infección por el Vibrio que los adultos. La respuesta inmune de A. ventricosus, a nivel bioquímico, fue modulada por V. parahaemolyticus. Se ensamblaron 82,468 contigs, 31,120 se anotaron contra la base de datos de proteínas del NCBI-nr. Se obtuvieron 491 genes relacionados con el sistema inmune. Se encontraron transcritos de receptores de reconocimiento de patrones moleculares (RRPMs), rutas de señalización inmune, efectores inmunes y de apoptosis. La mezcla de bacilos en el agua de cultivo de A. ventricosus aumentó significativamente la expresión de los genes HSP70, PEL y qPUP. A. ventricosus es muy susceptible a V. parahaemolyticus pero los aditivos naturales mejoran el crecimiento y su resistencia ante la infección. El V. parahaemolyticus modula la respuesta inmune a nivel bioquímico. A nivel genético, este es el primer reporte sobre transcritos de genes involucrados en la respuesta inmune de A. ventricosus que permiten dilucidar la complejidad de su sistema inmune innato, el cual le permite adaptarse a la vida en un ambiente acuático rico en patógenos potenciales. ABSTRACT: The clam catarina Argopecten ventricosus constitutes an important fishing resource in Mexico, mainly in the Gulf of California, but due to overfishing the natural populations of this species collapsed, it is also known that the incidence of diseases causes massive mortalities in the crops. Because of this, efforts have been made to develop the crop for commercial and repopulation purposes. Therefore, the survival, growth and immune response of seeds and adults of Argopecten ventricosus treated with natural additives and challenged with Vibrio parahaemolyticus was determined. Susceptibility and mean lethal concentration of V. parahaemolyticus were evaluated in seeds and adults challenged by immersion, that is, the pathogenic bacteria were inoculated in the culture water. Histological analysis was performed in adults challenged by immersion. The growth was evaluated in seeds of A. ventricosus, adding in the water a mixture of probiotics isolated from clam catarina (MPAC), inulin and fulvic acid. Adult organisms were injected into the adductor muscle with Vibrio parahaemolyticus heat-inactivated to analyze the immune response at the biochemical level (hemocyte count, phenoxidase and lysosomal enzymes) and molecular (transcriptome). A cDNA library obtained from a pool of gonad, muscle, hepatopancreas, gills and hemocyte RNAs was sequenced on the Illumina NextSeq platform 2 x 75 cycles of infected organisms. Seeds and adults were susceptible to V. parahaemolyticus showing an LC50 of 623 CFU/mL and 62,853 CFU/mL, respectively. The toxins of V. parahaemolyticus caused damage to the digestive glands of adults. Significant variations were observed in the number and area of hemocytes, phenoloxidase activity and lysosomal hydrolytic enzymes, mainly at 8 and 24 h after infection. Natural additives improve the growth of A. ventricosus and give it greater 17 resistance to infections caused by V. parahaemolyticus. The additives significantly improved the growth in weight, length, height and width of the seeds and the survival before the challenge with vibrio. Seeds are more susceptible to infection by Vibrio than adults. The immune response of A. ventricosus, at the biochemical level, was modulated by V. parahaemolyticus. 82,468 contigs were assembled, 31,120 were scored against the NCBI-nr protein database. 491 genes related to the immune system were obtained. Transcripts of molecular pattern recognition receptors (RRPMs), immune signaling pathways, immune effectors and apoptosis were found. The mixture of bacilli in the culture water of A. ventricosus significantly increased the expression of HSP70, PEL and qPUP genes. A. ventricosus is very susceptible to V. parahaemolyticus but natural additives improve growth and its resistance to infection. V. parahaemolyticus modulates the immune response at the biochemical level. At the genetic level, this is the first report on gene transcripts involved in the A. ventricosus immune response that allows to elucidate the complexity of its innate immune system, which allows it to adapt to life in an aquatic environment rich in potential pathogens. es
dc.description.sponsorship CONACYT es
dc.language.iso es es
dc.subject Argopecten ventricosus es
dc.subject Vibrio parahaemolyticus es
dc.title Crecimiento, supervivencia y respuesta inmune de la almeja catarina (Argopecten ventricosus) tratada con productos naturales y retada con Vibrio parahaemolyticus es
dc.contributor.advisor Luna González, Antonio
dc.contributor.advisor Diarte Plata, Genaro


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