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Utilidad de las porinas de Salmonella typhi para desarrollar una prueba diagnóstica de fiebre tifoidea con alto grado de especificidad y sensibilidad

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dc.contributor.author Gutiérrez Mendoza, Mireille
dc.date.accessioned 2012-04-12T21:29:13Z
dc.date.available 2012-04-12T21:29:13Z
dc.date.created 2010-06-14
dc.date.issued 2012-04-12T21:29:13Z
dc.identifier.citation Gutiérrez Mendoza, Mireille. (2010). Utilidad de las porinas de Salmonella typhi para desarrollar una prueba diagnóstica de fiebre tifoidea con alto grado de especificidad y sensibilidad (Maestría en Biomedicina y Biotecnología Molecular). Instituto Politécnico Nacional, Sección de Estudios de Posgrado e Investigación, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, México.
dc.identifier.uri http://tesis.ipn.mx/handle/123456789/9290
dc.description Tesis (Maestría en Biomedicina y Biotecnología Molecular), Instituto Politécnico Nacional, SEPI, ENCB, 2010, 1 archivo PDF, (76 páginas). tesis.ipn.mx
dc.description.abstract RESUMEN: La fiebre tifoidea es una infección sistémica en el hombre, se adquiere por la ingestión de alimentos o agua contaminados con Salmonella enterica serovar Typhi (S. typhi). Esta enfermedad es un problema mundial de salud pública, cálculos de la Organización Mundial de la Salud reportan alrededor de 21 millones de casos con aproximadamente 220 000 fallecimientos al año, sin embargo, este dato puede estar subestimado debido a los diferentes métodos analíticos empleados en para detectar al microorganismo o a los anticuerpos generados en respuesta a la infección. Debido a lo anterior en el presente trabajo se decidió evaluar la utilidad de 4 de las proteínas que se expresan en la membrana externa de S. typhi denominadas porinas (OmpC, OmpF, OmS1 y OmpS2), como una herramienta para el desarrollo de nuevos métodos de diagnóstico para esta enfermedad, que pudieran superar en rapidez, especificidad y sensibilidad a los métodos ya existentes. Se utilizaron sueros de pacientes con fiebre tifoidea (n=15) y de sujetos sanos (n=10), sin antecedentes de tifioidea) y la presencia de anticuerpos específicos IgM, IgG, IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4 fue determinada por un ensayo inmunoenzimático en fase sólida (ELISA). Los resultados fueron confirmados por inmunotransferencia y por un análisis in silico de los epitopos en las proteínas. Nuestros resultados muestran que entre las 4 proteínas de membrana externa probadas, la porina OmpC es la única que es reconocida en forma específica por los anticuerpos presentes en los sueros de pacientes confirmados con fiebre tifoidea y no por los presentes en el suero de personas sanas, lo cual permitiría que esta proteína pudiera ser empleada para el desarrollo de un nuevo método diagnóstico que confiera ventajas sobre los existentes.
dc.description.abstract ABSTRACT: Salmonella enterica serovar Typhi (S. typhi) is the causative agent of typhoid fever, a contagious infectious disease acquired by consuming contaminated food or water. Developing countries or places with extreme poverty are the most affected by typhoid. World Health Organization calculates a total of around 21 million of cases and 220,000 deaths caused by typhoid fever worldwide every year. Due to the absence of efficient diagnosis probes, an appropriate epidemiological monitoring of S. typhi is lacking, therefore the precise numbers for morbidity and mortality caused by this disease is unknown. As response to this problem, we decided to evaluate the utility of S. typhi porins as a reagent to develop new diagnostic test for typhoid. Porins are pores in the outer membrane of the bacteria, we evaluated the utility of both, major (OmpC and OmpF) and minor porins (OmpS1 and OmpS2) to diagnose typhoid fever patients. We searched for antibodies to S. typhi porins in the sera of both, typhoid fever patients (n = 15) and healthy subjects (n = 10, no history of typhoid fever). IgM and IgG, as well as IgG1, IgG2, IgG3 and IgG4 antibody subclasses were determined by solid-phase immunosorbent assay (ELISA) and confirmed by immunoblotting as well by an in silico analysis of the porins epitopes. In comparison to healthy subjects, we found significantly higher titers of, IgG and IgM anti-porins antibodies in the serum of patients with typhoid fever, these antibodies recognized mainly OmpC porin. Antibodies subclasses analysis demonstrated that sera from patients with typhoid fever and healthy subjects also recognized OmpF, OmpS2 and OmpS1. Our results show that OmpC porin is a suitable antigen to develop new diagnostic test for typhoid fever.
dc.language.iso es es
dc.subject Salmonella typhi
dc.subject Fiebre tifoidea
dc.subject Alimentos contaminados
dc.subject Typhoid fever
dc.subject Contaminated food
dc.title Utilidad de las porinas de Salmonella typhi para desarrollar una prueba diagnóstica de fiebre tifoidea con alto grado de especificidad y sensibilidad es
dc.type Thesis es
dc.contributor.advisor López Macías, Constantino III Roberto
dc.contributor.advisor González Y Merchand, Jorge Alberto


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