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Efecto de un proceso de inmovilización por gelación iónica sobre la actividad proteolítica de mexicaína

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dc.contributor.author Flores Miranda, Grisel Adriana
dc.date.accessioned 2012-06-04T17:15:03Z
dc.date.available 2012-06-04T17:15:03Z
dc.date.created 2011
dc.date.issued 2012-06-04T17:15:03Z
dc.identifier.citation Flores Miranda, Grisel Adriana. (2011). Efecto de un proceso de inmovilización por gelación iónica sobre la actividad proteolítica de mexicaína. (Maestra en Ciencias en Bioprocesos). Instituto Politécnico Nacional, Sección de Estudios de Posgrado e Investigación, Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología. México.
dc.identifier.uri http://tesis.ipn.mx/handle/123456789/9619
dc.description Tesis (Maestra en Ciencias en Bioprocesos), Instituto Politécnico Nacional, SEPI, UPIBI, 2011, 1 archivo PDF, (68páginas), tesis.ipn.mx
dc.description.abstract En el presente trabajo se realizó el atrapamiento de mexicaína con alginato de calcio, empleando la técnica de gelación iónica. Por medio de esta técnica de inmovilización se analizó el efecto de la concentración de alginato de sodio (Al-Na) y cloruro de calcio (CaCl2) sobre las propiedades físicas del sistema de atrapamiento. El comportamiento del sistema de inmovilización de la enzima se analizó por medio de un diseño experimental central compuesto, teniendo como factores la concentración de alginato de sodio y cloruro de calcio para un total de trece corridas con cinco repeticiones en el punto central. Las respuestas analizadas fueron el tamaño, fuerza de compresión, índice de inmovilización y la actividad proteolítica. Las cápsulas producidas presentaron formas esféricas con un diámetro entre 1.41 y 2.38 mm así también el análisis de la textura de las esferas mostró que concentraciones bajas de alginato (1%) y de CaCl2(0.1 M) generan esferas más resistentes. El índice de inmovilización máximo (95.66%) se presentó a una concentración de alginato de sodio de 1.5% y 0.06M de cloruro de calcio, observándose un efecto significativo en el cambio de esta propiedad debido a la concentración del biopolímero y el catalizador (CaCl2). La actividad proteolítica se determinó al tiempo cero ya a los 3 meses de almacenamiento, observándose que después de este tiempo la actividad de la enzima inmovilizada fue superior (60 %) respecto la enzima libre (8 %). También se encontró que la enzima encapsulada fue más estable en un intervalo de pH (5.0 –10) y a un intervalo de temperatura de 25 °C –65 °C, con respecto a la enzima libre. Mediante el uso de microscopía electrónica de barrido (MEB) se observó que al incrementar la concentración de alginato de sodio se reduce la rugosidad en la superficie de las esferas de atrapamiento, por otro lado el empleo de microscopía confocal permitió demostrar que la enzima se encontraba atrapada en las paredes de la esfera. Para evaluar la capacidad de reutilización de la mexicaína se determinó la actividad residual de la enzima inmovilizada mostrando 43% de actividad residual después de haber sido utilizada 5 veces continuas bajo las mismas condiciones de operación.
dc.description.abstract Mexicain enzyme was immomobilized by ionic gelation on sodium alginate. Capsules were prepared in order to develop a biocompatible matrix for enzyme immobilization and the capsule core was formed by crosslinking sodium alginate with calcium ions (CaCl2.). The enzyme immobilization system was prepared according to response surface methodology with a composite central design with five repetitions in the central point with 13 runs. The following response variables were used: the size capsule, strength, capsulation yield, and proteolytic activity. The last variable was evaluated periodically withinthree months of storage (5°C). The capsules were assayed by scanning electronic microscopy and confocal microscopy. The encapsulation system showed capsules with a diameter of between 1.41 and 2.38 mm and spherical shapes. Strongest capsules were obtained to concentrations of alginate (1%) and CaCl2(0.1 M). The immobilized enzymes were more stable in a 5.0 to 10pH range and a 25 °C to 65 °C temperature range with respect to the free enzyme. The immobilized enzymes retained greater a ctivity (60%) than free enzymes (8%). The reusability of immobilized mexicain showed 43% residual activity after being used 5 times continuously. en
dc.description.sponsorship Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT)
dc.description.sponsorship Dr. Eduardo San Martín Martínez del Centro de Investigación en Ciencia Aplicada y Tecnología Avanzada Unidad Legaria
dc.language.iso es es
dc.subject Bioprocesos
dc.subject Enzimas
dc.subject Actividad enzimática
dc.title Efecto de un proceso de inmovilización por gelación iónica sobre la actividad proteolítica de mexicaína es
dc.type Tesis es
dc.contributor.advisor Yáñez Fernández, Jorge
dc.contributor.advisor Güemes Vera, Norma


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