Expresión de mRNA para citocinas involucradas en la síntesis de lgA y del plgR en la mucosa nasal de ratones inmunizados con extractos de Naegleria Fowleri más CT

Abstract

ABSTRACT: The nasal mucosal is the first site of contact with inhaled antigens to induce IgA response. However, the nature of local immune response and the role of this site in immune responses have rarely been studied. It has been previously reported that intranasal administration of amebal lysates together with cholera toxin (CT) increases protection against Naegleria fowleri meningoencephalitis in mice. In that study it has been proposed that IgA appear to play an important role in the protection against this infection. For this reason, in this model, we characterize some immune factors involved in mucosal immune responses such as production and synthesis IgA associated cytokine and pIgR mRNA expression of mucosal cells residing in nasal-associated lymphoid tissue (NALT) and nasal passages (NP). mRNA expression from normal, infected (5x104 trophozoites) and immunized mice intranasally with amebal lysates plus cholera toxin (CT) was compared. We also compared mucosal IgA antibody responses in the same groups of mice. TNF mRNA was expressed strongly in the NALT from both infected and immunized mice; meanwhile in NP, TNF mRNA expression was significantly greater in infected mice. IFNγ e IL-10 mRNA expression increased in PN from immunized mice. pIgR mRNA expression in PN from immunized mice was higher than infected and normal mice. TGFβ mRNA expression was an increase in NALT form immunized mice with amoebal lysates plus CT. Alpha IgA chain mRNA expression was increased in NALT and PN from all groups of mice compared with the normal animals but principally was increased in immunized mice. On the other hand, when we measured mucosal IgA antibody, we found an increase in immunized mice. The increased of some cytokine mRNA expression and high IgA response in the nasal mucosa by immunization, seem to play a role in the host defense against N. fowleri infection.

RESUMEN:La mayoría de los microorganismos patógenos invaden el organismo a través de las mucosas. La mucosa olfatoria en particular es un sitio de entrada de diversos patógenos, como bacterias, parásitos y sobre todo virus. Sin embargo, existen muy pocos trabajos que expliquen cómo actúa el sistema inmune a nivel del epitelio olfatorio. Para tratar de describir los factores inmunes que actúan a nivel de la mucosa nasal, en este trabajo utilizamos el modelo de la meningoencefalitis amebiana primaria en ratón. También empleamos un esquema de inmunización a través del cual protegemos al total de ratones inmunizando por la ruta intranasal con extractos de N. fowleri coadministrados con la toxina del cólera (CT). Mediante el modelo de infección y el de protección se analizó la expresión de mRNA de algunas citocinas y del pIgR involucradas en la síntesis de IgA en la mucosa nasal de ratones sanos (grupo control), infectados e inmunizados (con extractos totales de N. fowleri más CT o CT sola) e infectados con los trofozoítos vivos de N. fowleri. En el NALT se encontró un notable incremento en la expresión del TNF en los ratones infectados e inmunizados, mientras que en los PN, se encontró que la expresión del TNF estuvo aumentada en los ratones infectados principalmente. La expresión de citocinas como el IFN? e IL-10 aumentó en los ratones inmunizados con CT sola y en los inmunizados con extractos de N. fowleri más CT respectivamente, pero solo en los PN. Los niveles de expresión de los mRNA del pIgR se encontraron aumentados en los ratones inmunizados con ambos tratamientos, pero solamente en los PN, La expresión del TGF? en el NALT tuvo un incremento en los ratones inmunizados con extractos más toxina. Cuando se midió la expresión de la cadena alfa de la IgA en ambos tejidos, ésta tuvo un incremento en todos los grupos de ratones analizados, principalmente en los inmunizados. Por otra parte, se encontró una alta producción de IgA en la cavidad nasal de los ratones inmunizados. Estos datos sugieren que la inmunización nasal con extractos de N. fowleri más CT inducen un cambio en el patrón de expresión de citocinas en la cavidad nasal el cual podría estar dirigido a una producción de IgA, la cual estaría involucrada en la protección contra la infección.