Efecto del virus del dengue serotipo 2 en la proliferación de linfocitos T

Abstract

ABSTRACT: Dengue is an infectious disease of viral origin transmitted by mosquitoes. It is currently a major cause of death in the world, infecting people living in urban areas located in tropical and subtropical regions. There are three forms of this disease; dengue fever, Hemorrhagic Fever and Shock Syndrome, whose main symptoms are fever, severe pain in the joints and muscles. The latter two are characterized by abnormal vascular permeability. In recent years, the importance to understand the disease has increased, however the progress is not sufficient. So far as a result, there is no treatment or efficient methods of prevention. Moreover, it has been found that dengue virus is capable of using various mechanisms to evade the immune system to sustain the environment for its replication and spread. Therefore, some lines of research have focused in studying and understanding the pathogenic mechanisms involved in the disease to help to develop more specific therapies, control and cure the infection. One important manifestation is the reducing number of T cells during the acute stage of infection. On this basis it is important to know whether it is caused by the dengue virus itself. This thesis focuses on analyzing the effect of dengue virus in the proliferation of T lymphocytes. Cell proliferation assays on freshly isolated human T cells in response to αCD3/αCD28 antibodies and PMA/Ionomycin were carried out with the aim of analyzing if intracellular calcium mobilization plays a role in the dengue virusinduced inhibition of T cell proliferation. We found that the dengue virus impairs the proliferation of the lymphocytes activated with PMA/ionomicina or αCD3/αCD28 antibodies but, apparently, inhibition of proliferation is not due to alterations in the mobilization of intracellular calcium.

RESUMEN: El Dengue es una enfermedad infecciosa grave de origen viral trasmitida por mosquitos. Constituye una causa importante de muerte en el mundo infectando a personas que viven en áreas urbanas que se localizan en regiones tropicales y subtropicales. Se puede manifestar en tres formas denominadas fiebre por dengue (dengue Clásico), Fiebre Hemorrágica y Síndrome de Choque cuyo principales síntomas suelen ser fiebre, dolor intenso en las articulaciones y en músculos. Las ultimas dos formas son complicaciones potencialmente fatales caracterizadas por permeabilidad vascular anormal. En los últimos años la importancia en comprender la enfermedad ha incrementado, sin embargo los avances que se tiene no son suficientes. Como consecuencia, no existe un tratamiento o métodos eficientes de prevención, ocasionado que en la actualidad la enfermedad se convierta en un problema creciente de salud. Se ha encontrado que el virus dengue es capaz de emplear diversos mecanismos que le ayudan ha evadir el sistema inmune y sustentar el ambiente apropiado para su replicación y propagación en el huésped. Por lo tanto, algunas líneas de investigación se enfocan en estudiar y entender los mecanismos implicados en la enfermedad, a fin de contribuir al desarrollo de terapias más específicas que ayuden al control y cura de la infección. Una manifestación clínica importante que se ha encontrado es la reducción del número de linfocitos T durante las etapas agudas de la infección. En base ha esto, con la finalidad de conocer si es por causa del virus del dengue, esta tesis se enfoca en conocer el efecto del virus dengue en la proliferación de linfocitos T. El efecto se determino mediante análisis de proliferación celular y con la finalidad de proponer un mecanismo por el cual este induciendo la inhibición de la proliferación de linfocitos T activados se determino la movilización de calcio intracelular. Para esto utilizamos linfocitos T humanos obtenidos de células mononucleares de sangre periférica enriquecidos por columnas de Nylon. Los linfocitos T se activaron con PMA/Ionomicina y anticuerpos ?CD3/?CD28 y se incubaron con el virus del dengue. Encontramos, que el virus dengue es capas de inhibir la proliferación de LT activados con PMA/Ionomicina y ?CD3/?CD28. La inhibición de la proliferación no involucra la alteración de la movilización de calcio intracelular.