Efecto del estrés oxidativo presente en la sangre de mujeres, sobre la estructura química y función de la insulina

Abstract

RESUMEN: Recientemente se demostró, que la capacidad oxidante de la sangre de pacientes diabéticos induce modificaciones químicas y funcionales en la insulina y considerando que las enfermedades cronicodegerativas como la Diabetes Mellitus y la obesidad cursan con un estado metabólico denominado Estrés Oxidativo, nuestro objetivo fue determinar si la sangre de obesos, tiene capacidad oxidante suficiente para modificar la estructura y función de la hormona peptídica insulina (recombinante), para lo cual se obtuvieron muestras sanguíneas de pacientes con sobrepeso y obesidad 1 (n=16), con IMC de 25 a 34.9, entre 20-40 años de edad, utilizando sangre de personas sanas como controles. Se diseño un sistema que consistió en colocar insulina dentro de una membrana de diálisis con un poro de 3,500 Da, la cual fue sumergida en la sangre recién obtenida de las pacientes y se incubó por 3 horas a 37 °C, después de este período se determinó daño oxidativo a la insulina, mediante la cuantificación de formazan por reducción de NBT y grupos carbonilo. Además se realizaron electroforesis no desnaturalizantes y por último se evaluó el efecto hipoglucemiante de la insulina en ratón. Los resultados se analizaron con un análisis de varianza (ANOVA) con una prueba pos hoc de Bonferroni, los resultados se muestran como promedios ± DE y el valor de p<0.5 se consideró estadísticamente significativo. Los resultados obtenidos fueron a) el incremento en las concentraciones de grupos carbonilo en ambos grupos estudiados sobrepeso (2.58 ± 0.4nmol asazonas/mg proteína) y obesidad 1 (2.80 ± 0.44nmol asazonas/mg proteína) en comparación con el grupo control (1.63 ± 0.34nmol asazonas/mg proteína), b) el incremento de formazan en el grupo de obesidad 1 (83.5 ± 7.8nmol formazan/mg de proteína) y d) disminución del efecto hipoglicemiante de la insulina oxidada por sangre de pacientes con obesidad 1 en un 18%, con lo pudimos concluir que la capacidad oxidante de la sangre de pacientes con obesidad 1 induce modificaciones químicas y estructurales en la insulina, modificando su función como hipoglicemiante en ratón.

ABSTRACT: Recently there was demonstrated, that the capacity oxidizer of the blood of diabetic patients induces chemical and functional modifications in the insulin and considering that the diseases cronicodegerativas as the Diabetes Mellitus and the obesity deal with a metabolic condition denomined Stress Oxidative, our aim was to determine if the blood of obese, capacity has sufficient oxidizer to modify the structure and function of the hormone peptídica insulin (recombinante), for which there obtained patients' blood samples with overweight and obesity 1 (n=16), with IMC from 25 to 34.9, between 20-40 years of age, using blood of healthy persons as controls. I design a system that consisted of placing insulin inside a membrane of dialysis with a pore of 3,500, it was immersed in the blood newly obtained of the patients and one incubated for 3 hours 37 °C, after this period decided damage oxidative to the insulin, by means of the quantification of formazan for NBT's reduction and groups carbonilo. In addition they were realized electroforesis not desnaturalizantes and finally the effect hipoglicemiante of the insulin in mouse was evaluated. The results were analyzed by an analysis of variance (ANOVA) by a test pos hoc of Bonferroni, the results show themselves as averages ± SD and the value of p <0.5 was considered to be statistically significant. The obtained results were a) the increase in the concentrations of groups carbonilo in both studied groups overweight (2.58 ± 0.4nmol asazonas/mg protein) and obesity 1 (2.80 ± 0.44nmol asazonas/mg) in comparison with the group control (1.63 ± 0.34nmol asazonas/mg protein), b) the increase of formazan in the group of obesity 1 (83.5 ± 7.8nmol formazan/mg of protein) and d) decrease of the effect hipoglicemiante of the insulin oxidized by patients' blood with obesity 1 in 18 %, with we it could conclude that the capacity oxidizer of the patients' blood with obesity 1 induces chemical and structural modifications in the insulin, modifying his function as hipoglicemiante in mouse.