Evaluación citotóxica y estudio fitoquímico de la raíz de verbesina persicifolia

Abstract

RESUMEN: La especie Verbesina persicifolia es una planta considerada maleza sobre la cuál recientemente se han descrito algunos efectos biológicos. En este contexto, en un estudio previo del mismo grupo de trabajo se encontró que un extracto de las hojas de V. persicifolia presentó efecto citotóxico. Por ello, surgió el interés de establecer el potencial citotóxico de la especie y se planteó en el presente trabajo, llevar a cabo la evaluación citotóxica del extracto de la raíz de Verbesina persicifolia. Se decidió hacer la evaluación sobre tres líneas celulares de cáncer de mama, una línea de cáncer cervicouterino y una línea de células epiteliales de mama, no tumorogénica. Se encontró que el extracto diclorometanico, presentó mejor efecto citotóxico con porcentajes de inhibición por arriba del 90% en cada una de las diferentes líneas evaluadas. Este resultado, llevó a realizar un fraccionamiento del extracto y seleccionar seis fracciones que cubren el perfil cromatográfico. Las fracciones con compuestos de menor polaridad no presentaron inhibición en la proliferación celular. Solo una de las fracciones, denominada F4 mostró actividad citotóxica, aunque fue menor la actividad mostrada, comparativamente con el extracto total. El análisis cromatográfico en capa fina de esta fracción, sugirió la presencia de al menos tres compuestos mayoritarios. Por lo que se aplicaron diferentes procesos cromatográficos para separar a éstos componentes y llevar a cabo su evaluación sobre líneas celulares. Se aislaron tres compuestos y dos de ellos fueron evaluados sobre las diferentes líneas celulares. Se observó, entonces que uno de ellos presentó un efecto mayor sobre la línea celular T-47D, con un valor de IC50 de 2.5 μg/mL. Esto sugiere que algunos compuestos del extracto parecen actuar de manera sinérgica. Aunque existe un compuesto que presenta la mayor actividad citotóxica. Al encontrar a este posible principio activo, se planteó determinar el tipo de muerte celular que induce, obteniéndose que hay un porcentaje importante de apoptosis. Los compuestos aislados del extracto, fueron caracterizados espectroscópicamente para establecer su naturaleza y estructura. Obteniendo como resultado que éstos son derivados sesquiterpenicos con un esqueleto base de eudesmano. ABSTRACT: The species is a plant Verbesina persicifolia considered weeds upon which recently described some biological effects. In this context, in a previous study of the same working group it found that an extract from the leaves of V. persicifolia presented cytotoxic effect. Therefore, it arose the interest of establishing the cytotoxic potential of the species and was raised in this work, to carry out the assessment cytotoxic root extract of Verbesina persicifolia. It was decided to make the assessment on three cell lines of breast cancer, cervical cancer line and a line of breast epithelial cells, non-tumorigenic. It was found that the extract dichloromethanic presented better cytotoxic effect with inhibition percentages above 90% in each of the different lines evaluated. This result led to make a fractionation of the extract and select six fractions covering the chromatographic profile. Fractions with less polar compounds showed no inhibition in cell proliferation. Only one of the fractions, named F4 showed cytotoxic activity, although activity was lower that shown comparatively with the total extract. Chromatographic analysis of this thin layer fraction, suggested the presence of at least three major compounds. So different chromatographic processes were applied to separate these components and carry out its evaluation of cell lines. three compounds were isolated and two of them were tested on different cell lines. It was noted then that one of them had a greater effect on T-47D cell line with an IC50 value of 2.5 μg/mL This suggests that some compounds appear extract act synergistically. Although a compound having greater cytotoxic activity. Possible to find this active ingredient was raised determine the type of cell death inducing give that a significant percentage of apoptosis. Extract isolated compounds were characterized spectroscopically to establish its nature and structure. Resulting in that these are sesquiterpene derivatives having eudesmane base skeleton.