Influencia del embarazo sobre los receptores a angiotensina II (AT1-AT2) en anillos de aorta de rata

Abstract

RESUMEN: En el presente trabajo se estudió la contractilidad arterial mediada por Ang II, de la aorta en sus dos segmentos, tanto torácico como abdominal, también se estudió el papel que juegan los mediadores endoteliales como el ON en el caso de la inhibición de la SONe con L-NAME (10-4M) y los productos derivados de la cilooxigenasa en el caso de la inhibición con Indometacina (10-6M); para esto se utilizó la preparación de órgano aislado donde se montaron anillos de aorta torácica y abdominal de ratas No Embarazadas (NE) y Embarazadas en la tercera semana de gestación. Se evaluó también, la expresión proteica de los receptores a Ang II (AT1y AT2) así como de las isoenzimas COX-1, COX-2 y SONe en el mismo grupo de animales mediante la técnica de inmunoblot. Por último, se determinó, mediante la técnica de inmunoprecipitación, la formación de un heterodímero entre los receptores AT1/AT2 en la aorta torácica y abdominal de ratas embarazadas y NE. Los resultados obtenidos proporcionan evidencia de que la respuesta contráctil a Ang II se encuentra disminuida durante el embarazo, y que la densidad de receptores AT1 no se modifica durante el mismo, sin embargo la de los receptores AT2 aumenta, por otro lado, también muestran que existen diferencias regionales en la expresión de ambos receptores a lo largo de la aorta, encontrándose una mayor expresión de los mismos en el segmento torácico en comparación con el abdominal tanto en animales no embarazados como embarazados; además se encontró que el óxido nítrico parece no jugar un papel muy importante en la modulación de la respuesta contráctil a Ang II a pesar de que se demostró un aumento de la SONe durante el embarazo en el segmento abdominal de la aorta; por otro lado, en la modulación de la vasoconstricción inducida por Ang II al parecer participa una prostaglandina contráctil, pues la inhibición de la COX, produjo una disminución de la respuesta a Ang II y esto fue más evidente en el segmento abdominal, mientras que también se demostró que ambas isoformas de la COX aumentaron su expresión proteica durante el embarazo en este segmento de la aorta. Por último se demostró la formación del heterodímero AT1/AT2 en la aorta en sus dos segmentos y que esta heterodimerización aumenta durante el embarazo en el segmento abdominal, lo que sugiere que la atenuación de la respuesta contráctil a Ang II esta dada por la formación de este heterodímero durante el embarazo

ABSTRACT: In the present work, we studied the contractility of the aortic thoracic and abdominal segments mediated by Ang II. We also studied the role of endothelial mediators as Nitric Oxide by inhibiting the eNOS with L-NAME (10-4M), and the products derived from cyclooxygenase by inhibiting the enzyme with Indomethacin (10-6M). We used an isolated organ preparation where rings from rat thoracic and abdominal aortas from pregnant and non-pregnant rats at the end of the third week of gestation were mounted. We also evaluated the protein expression of Ang II receptors (AT1y AT2), COX-1, COX-2 and eNOS isoenzimes in groups of pregnant and non-pregnant animals using immunoblot. Finally, using an immunoprecipitation technique, we determined AT1/AT2 receptors heterodimerization in the thoracic and abdominal aorta from non-pregnant and pregnant rats. The results obtained show that the contractile response to Ang II is diminished at the end of pregnancy, and the expression of AT1 receptors is not modified in the pregnant rats. The expression of AT2 receptors however, is increased. We also found that there is a differential, regional expression of both receptors along the aorta, being the expression higher in the thoracic segment in comparison with the abdominal segment in both not-pregnant and pregnant rats; besides, we found that nitric oxide seems not to play an important role in the modulation of the contractile response to Ang II, despite of this, we showed in this work an increased expression of eNOS during pregnancy in the abdominal segment of the aorta. Interestingly, in the vasoconstrictor response elicited by Ang II, a contractile prostaglandin probably participates, given that the inhibition of the COX isozymes by indomethacin decreased the contractile response to Ang II and this effect was more evident in the abdominal segment. By immunoblot, protein expression of both isoforms of COX increased at the end of the pregnancy in this aorta segment. Finally, AT1/AT2 heterodimerization was shown in both aortic segments. In abdominal segment from pregnant animals, heterodimerization was higher than thoracic segment, suggesting that the blunted response to Ang II could be explained in part, by formation of this heterodimere during pregnancy.