Determinación de apoptosis en células de sangre periférica y su correlación clínica en pacientes diabéticos tipo 2 con infecciones en tejidos blandos

Abstract

RESUMEN: La diabetes mellitus tipo 2 (DM2) constituye un problema de salud pública mundial creciente. Esta enfermedad se caracteriza por la deficiente secreción o utilización de insulina que lleva a graves alteraciones en el metabolismo y al daño orgánico múltiple. Las infecciones de los tejidos blandos son frecuentes en los pacientes diabéticos. Los pacientes con DM pueden presentar incremento en la apoptosis de leucocitos de sangre periférica (LSP) debido a la hiperglucemia persistente, lo que puede afectar la respuesta inmune contra infecciones. Por lo que en este trabajo se estudió la presencia de apoptosis en LSP de pacientes con DM2 con infección en tejidos blandos y su correlación con evolución clínica. Se evaluó la proporción de células en apoptosis “espontánea” e “inducida” mediante la determinación de caspasa 3 activa, expresión de Fas y FasL por inmunohistoquímica, además de la fragmentación de DNA por la técnica de TUNEL. Se observó que los pacientes con DM2 e infección en tejidos blandos presentan más apoptosis inducida (TUNEL) y expresión de FasL en LSP. Se encontró correlación entre apoptosis inducida y expresión de FasL o glucemia, la cual también correlaciona con la expresión de Fas y FasL. Así mismo, encontramos correlación entre la expresión inducida de FasL y el índice DOQUI y osmolaridad sanguínea. En este trabajo mostramos por primera vez que existe un incremento en la apoptosis inducida de LSP en los pacientes DM2 con infección, lo cual puede explicar en parte la inmunosupresión con que cursan. Estos resultados sugieren mecanismos de apoptosis dependientes de caspasas con la posible participación de Fas y FasL. La correlación entre glucemia y expresión de Fas y FasL, sugiere que, de manera directa o indirecta, la glucosa induce la expresión de estas moléculas, lo cual podría explicar el mecanismo de la inducción de apoptosis en pacientes con DM2.

ABSTRACT: Type 2 diabetes mellitus (DM2) constitutes an increasing worldwide public health problem. This disease is defined by a deficient secretion or peripheral utilization of insulin which drives to severe metabolic alterations and multiple organic damages. Soft tissue infections are common among diabetic patients. DM2 patients may increase peripheral blood leukocytes (PBL) apoptosis due to the persistent hyperglycemia, which may impair the immune response against infections. Therefore, in this work we studied the presence of apoptosis of PBL in DM2 patients with soft tissue infections, and weather there is correlation with the clinical features. The proportion of cells with “spontaneous” or “induced” apoptosis was assessed determining active caspase 3, Fas, and FasL expression by immunohistochemistry, and DNA fragmentation by TUNEL in PBL. We found that patients with DM2 and soft tissue infections showed more induced apoptosis (TUNEL) and FasL expression in PBL. Correlation between induced apoptosis and FasL or glycemia was found, which also correlated with Fas and FasL expression. Correlation between FasL expression and the DOQUI index and blood osmolarity was also found. In this work we demonstrated for the first time an increase in PBL induced apoptosis of DM2 patients with infection, which in part may explain the immumosupression they present. These results suggest a caspase dependent apoptosis mechanism with the participation of Fas and FasL. The correlation between glycemia and Fas and FasL expression suggests that glucose may, directly or indirectly, induce the expression of these molecules, which may explain the induction of apoptosis in DM2 patients