RESUMEN: Las radiaciones son fenómenos físicos consistentes en la emisión, propagación y absorción de energía por parte de la materia. Se clasifican en dos tipos: ionizantes y no ionizantes. Los efectos biológicos de las radiaciones pueden ser en primera instancia sobre las células. Se han desarrollado sistemas de prueba con el propósito de evaluar los efectos producidos por agentes químicos ambientales, a los que el hombre está expuesto, dentro de ellos se encuentran el ensayo cometa y la prueba de micronúcleos que son los estudios que se aplicaron en este trabajo. Los micronúcleos (MN) se forman a partir de fragmentos de cromosomas o cromosomas completos, que espontáneamente o por agentes externos sufren rupturas, o dañan el huso acromático. Su forma es generalmente redonda o almendrada, con un diámetro que varía desde 0.4 a 1.6 micras. La prueba de micronúcleos fue desarrollada por W. Schmid en 1975 y en el año de 1999, fue validada a nivel mundial y considerada como un biomarcador efectivo de daño en el ADN. La electroforesis de células individuales o ensayo cometa es una prueba rápida, de bajo costo y altamente sensible, permite el análisis del daño genético a nivel de células individuales. Se utiliza para monitoreo ambiental y análisis de sensibilidad a radiaciones. Esta técnica brinda información más precisa del nivel de daño al ADN. Los objetivos del presente estudio son determinar mediante las pruebas de electroforesis unicelular y micronúcleos; el efecto genotóxico producido por los rayos X en individuos expuestos laboralmente; determinar la cantidad de micronúcleos en células de la mucosa oral y el daño a su ADN por electroforesis unicelular y electroforesis unicelular modificada. Los casos o técnicos de rayos X son trabajadores del área de imagenología de un laboratorio de análisis clínicos localizado en la Ciudad de México, D.F., cuyas edades oscilan entre los 20 y 40 años, y con exposición de 1 hasta 20 años a los rayos X. El grupo control son personas residentes en la misma localidad, sin exposición a rayos X en su trabajo, cuyas edades y hábitos son similares a los del grupo de trabajadores expuestos a la radiación. El tamaño final del grupo fue de 14 personas expuestas y 9 controles. Los participantes contestaron un cuestionario sobre información personal de salud, antecedentes heredofamiliares, consumo de medicamentos, hábitos de alimentación así como historia de exposición laboral. (Anexo 1). Las muestras biológicas de mucosa oral se obtuvieron recolectando raspados de epitelio oral de cada uno de los colaboradores haciendo un frotis de la pared interna de ambas mejillas, que posteriormente se colocó en un portaobjetos. Las muestras de sangre se tomaron, en tubos heparinizados. Micronúcleos de epitelio oral: Se realizó mediante la técnica utilizada por Countryman y Heddle (1976).Ensayo cometa: Se realizó mediante la técnica de Singh et al (1998).Resultados: Se aplicó como método estadístico la Prueba “T de Student” para ambos casos. En la prueba de micronúcleos, con significancia en el límite para una cola, con p<0.05 y p<0.1 para dos colas. En el ensayo cometa, se obtuvo un alto nivel de significancia: p<.005 para una cola y p<0.01 para dos colas. También se realizó un análisis de varianza bifactorial, el cual mostró que no hay diferencias significativas en el tiempo de exposición y los resultados obtenidos del ensayo cometa. Conclusiones: Los resultados muestran daño genómico inducido por radiaciones ionizantes. El ensayo cometa demostró tener mayor sensibilidad en comparación con la prueba de micronúcleos,
ABSTRACT: The radiations are physical phenomena involving the emission, propagation and absorption of energy by matter. They are classified into two types: ionizing and non ionizing. The biological effects of radiation may be in first instance on cells. Test systems have been develop in order to evaluate the effects of environmental chemical agents, to which man is exposed, within them are the comet assay and micronucleus test, those tests are the ones we applied in this investigation. Micronucleus (MN) are formed from fragments of chromosomes or whole chromosomes, which spontaneously or by external agents suffer ruptures, or are damage the achromatic spindle. Its shape is usually round or almond like, with a diameter varying from 0.4 to 1.6 microns. W. Schmid develop the micronucleus test in 1975 and by the year 1999, was validated and considered worldwide as an effective biomarker of DNA damage. The single cell electrophoresis or comet assay is a rapid, low cost and highly sensitive test; it allows analysis of genetic damage at the level of individual cells. It is use for environmental monitoring and analysis of sensitivity to radiation. This technique provides precise information on the level of DNA damage. The aims of this study are determine by single cell electrophoresis tests and micronuclei, the genotoxic effect produced by X rays in occupationally exposed individuals, determine the number of micronuclei in oral mucosal cells and damage to their DNA by the single-cell electrophoresis test and modified single cell electrophoresis test. Cases or X-ray technicians are employees of the imaging area of a clinical laboratory, located in Mexico City, their age are between 20 and 40 years old, and have been exposed from 1 a 20 years to the X-rays. The control group is composed of persons of the same place of residence, without exposure to X-rays in their job, their ages and habits are similar to those of the group of workers exposed to radiation. The final size of the group was 14 cases and 9 controls. Participants answered a questionnaire on personal health information, family history records, drug consumption, diet habits and occupational exposure history to radiation. (Annex 1). Oral mucosa scrapings were due to collect the biological samples from oral epithelium of each of the employees making a smear of the inside of both cheeks, the samples were place on a slide. Blood samples were place in heparinized tubes. Micronuclei of oral epithelium: It was perform by the technique used by Countryman and Heddle (1976). The Comet assay: was performed using the technique of Singh et al (1998). Results: In the test of micronucleous, with significance in it limits to a tail with p<0.05 and p<0.1 to two tails. In the comet assay obtains a high level of significance: p<0.005 to one tail and p<0.01 to two tails. In addition, an analysis of bifactorial variance was realize and it shows us that there are no significant differences in the exposure time and the results obtained from comet assay. Conclusion: the results show genomic damage induced by ionizing radiations. The comet assay shows to be better than the micronucleous test.
