Evaluación in vivo de la actividad anticoagulante de polisacáridos sulfatados extraidos del alga Macrocystis pyrifera

Abstract

Las algas contienen varios fucanos y galactanos sulfatados que presentan actividad anticoagulante y es importante determinar si estas moléculas generan efectos secundarios a largo plazo. En el presente trabajo se evaluó la actividad moduladora de la coagulación sanguínea “in vivo e in vitro” de polisacáridos sulfatados obtenidos de Macrocystis pyrifera. El extracto crudo se obtuvo a partir de 1 kg de alga con agua destilada a 55°C. La solución clarificada fue sometida a un fraccionamiento sólido-líquido en DEAE-celulosa con eluyentes de NaCl a 0.5, 1 y 2 M. Se obtuvieron cuatro fracciones, de las cuales 06-019-61 F1A (23.529 g), mostró 183.90 en la prueba de tiempo de protrombina (TP) así como 260s de tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPa). Se envió 0.2 g de la fracción a la Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía-IPN para determinación de resonancia magnética nuclear y espectrofotometría de infrarrojo en CICIMAR-IPN. En las pruebas in vivo se aplicaron las dosis de 5, 2, 0.5 mg/kg de la fracción 06-019-61 F1A vía intraperitonial al organismo Mus musculus (Cepa CD-1) durante tres meses y se realizó análisis de biometría hemática, tiempos de coagulación (TP Y TTPa) y Química sanguínea (SMAC24). Cada uno de los análisis anteriores, se sometió al método estadístico de Friedman, el cual mostró diferencias significativas solo en dos parámetros de biometría hemática y un parámetro de SMAC 24. Los ensayos de TP y TTPa in vivo mostraron inhibición del coagulo en los primeros 15 días de tratamiento, después fueron normales (13s y 45s respectivamente). En los análisis histológicos se encontró infiltración bacteriana en ventrículo izquierdo de corazón, infiltración grasa en miocardio y pericardio; en hígado se encontró hemosiderina, hiperplasia y deformación de hepatocitos. En riñón se encontró deformación de túbulos proximales y distales, hiperplasia y dilatación glomerular. El pulmón mostró hiperplasia y al igual que el bazo, infiltración sanguínea y hemosiderina. En médula ósea se encontró infiltración grasa. Abstract Algae contain various sulfated galactans and fucans having anticoagulant activity and it is important to determine whether these molecules produce long term side effects. In this study we evaluated the modulatory activity of blood coagulation "in vivo and in vitro" sulfated polysaccharide obtained from Macrocystis pyrifera. The crude extract was obtained from 1 kg of seaweed with distilled water at 55 ° C. The clarified solution was subjected to a solid-liquid fractionation on DEAE cellulose eluting with NaCl at 0.5, 1 and 2 M. Four fractions were obtained, of which F1A 06- 019-61 (23.529 g), showed the prothrombin time test (PT) for 183.90s and 260s of activated partial thromboplastin time (aPTT). It sent 0.2 g of the fraction to the Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía-IPN for determination of nuclear magnetic resonance and determination infrared spectrophotometry in CICIMAR-IPN. In vivo tests were applied doses of 5, 2, 0.5 mg/kg of fraction F1A 06-019-61 via intraperitoneal at the organism Mus musculus (strain CD-1) for three months and performed blood count analysis, clotting times (PT and aPTT) and blood chemistry (SMAC24). Each of the above analyzes, underwent Friedman statistical method, which showed significant differences in only two parameters OF blood count analysis and only one in SMAC 24. The PT and aPTT tests showed inhibition of in vivo clot in the first 15 days of treatment, were normal after (13s and 45s, respectively). The histological analyzes showed bacterial infiltration in the left ventricle of heart and fatty infiltration in myocardium and pericardium; hemosiderin found in liver, hyperplasia and hepatocyte deformation. Was found deformation in proximal tubule and distal in kidney, hyperplasia and dilation of glomerulus. Showed hyperplasia in lung and like spleen, blood infiltration and hemosiderin. In bone marrow fat infiltration was found.