Análisis antimicrobiano de extractos y nanopartículas de oro derivadas de plantas para el tratamiento de neumonía en tortugas (Trachemys y Graptemys)

Abstract

RESUMEN:

Introducción Las tortugas son animales que se compran para ser mascotas de niños por sus colores y formas del caparazón atractivas. Sin embargo los niños no cuentan con la suficiente madurez para hacerse cargo de éstas por lo que generalmente presentan problemas como la neumonía. Esta enfermedad resulta en la inflamación de los pulmones principalmente por infecciones de bacterias patógenas como la Pseudomona aeruginosa. Metodología El trabajo incluye cinco etapas. La primera consistió en el aislamiento y la identificación de Pseudomonas sp obtenidas de muestras bucales de 30 tortugas del genero Graptemys y Trachemys con pruebas bioquímicas reportadas en la bibliografía. La segunda etapa fue obtener los extractos naturales de las plantas que se propusieron para el tratamiento de la neumonía para ser usados en análisis de sensibilidad. La tercera etapa fue la síntesis de nanopartículas de oro (AuNPs) con la técnica de Turkevich modificada (1951) y Rico Moctezuma (2010) en base a una reacción de oxidación de las sales de oro con extractos naturales de Syzygium Aromaticum (clavo), Matricaria Chamomilla (Manzanilla), Morinda Citrifolia (Noni), Lobaria Pulmonaria (Pulmonaria), Filipendula ulmaria (ulmaria), Adstringens amphipterygium (Cuachalalate), Gnaphalium viscosum(Gordolobo), Olea europea (hojas de olivo) y Allium sativum (Ajo) como agentes reductores. La cuarta etapa consistió en la caracterización de las AuNPs por Microscopia Electrónica de Transmisión y Espectroscopia UV-Vis para la identificación del diámetro de partícula y la morfología. La quinta etapa se trabajó a la par con la cuarta y fue el análisis antimicrobiano de las Pseudomonas sp aislado de tortugas con los extractos naturales y las AuNPs para observar si existía sensibilidad o no. A esta etapa se le agrego el con la enrofloxacina como punto de comparación. Resultados y discusión De las 9 plantas propuestas para el tratamiento de la neumonía únicamente los extractos de ajo, cuachalalate y clavo así como las AuNPs sintetizadas con estos mismos extractos presentaron efecto inhibitorio positivo pero no en todas las cepas aisladas. A estos resultados se incluyen las AuNPs de manzanilla atribuyendo esto a la concentración del extracto de manzanilla que fue menor a comparación del extracto puro. El tamaño de los halos de inhibición que se presentaron en ambos casos oscila en diámetros de entre uno y dos centímetros que se consideran pequeños en comparación con los obtenidos con la enrofloxacina que se encuentran en diámetros superiores a los cuatro centímetros. Pese a lo anterior no se debe de descartar el uso de estas plantas y esta técnica nanotecnológica debido a que la enrofloxacina es un fármaco de alto espectro que incluye bacterias Gram negativas, Gram positivas y micoplasmas que pueden generar otros problemas en las tortugas por efecto de la inhibición de la flora normal de estas. Con respecto a la síntesis y caracterización de las AuNPs de las nueve plantas propuestas se presentó una síntesis negativa con los extractos de gordolobo y ulmaria atribuyendo esto a la baja concentración de metabolitos secundarios que funjan como agentes reductores. De las otras nanopartículas sintetizadas estos tamaños oscilan de entre los 20 y 100 nm de diámetro con formas irregulares, esféricas y triangulares. Conclusiones El extracto acuoso de ajo, cuachalalate y clavo y sus AuNPs son agentes que inhiben algunas cepas aisladas de Pseudomonas sp pertenecientes a la flora bacteriana normal de las tortugas de la familia Trachemys y Graptemys muestreadas. También presentaron inhibición las AuNPs de manzanilla frente a una única cepa de Pseudomonas sp atribuyéndolo a la concentración menor del extracto de manzanilla. También no todas las plantas son capaces de proveer agentes reductores y agentes dispersantes para sintetizar AuNPs como es el caso de la Filipendula ulmaria (ulmaria) y Gnaphalium viscosum (gordolobo) atribuyendo esto a que los metabolitos secundarios que se encuentran en las plantas no actúan como agentes reductores o en su defecto como agentes dispersantes que son aquellos que evitan su aglomeración.